mix all the dreams and hopes in the world

Rabu, 06 Juni 2012

METODE UNTUK MELIHAT JARINGAN PENGIKAT : Metode Aldehyde Fuchsin (Gomori)

Untuk melihat elastin (Gurr, 1960)

Reagen yang diperlukan :
A. Alkohol 70 %                   100 ml
    Kristal Iodin                       0,5 gram
B. Sosium thioshulphat          0,75 gram 
    Alkohol 96%                       10 ml
    Aquadest                             90 ml
C. Basic fuchsin                      0,5 gram
    Alkohol 70%                      100 ml
    Hydrochloric acid, conc          1 ml
    Paraldehyde                           1 ml

Larutan basic fushcin dalam alkohol: kemudian tambahkan pada larutan basic fuchsin-alkohol dingin CHI dan paraldehyde. Biarkan selama 24 jam hingga larutan berwarna violet.


Catatan
Larutan tersebut dapat ditahan selama 4 minggu dalam suhu kamar. Tetapi bila larutan pewarna tersebut sudah berumur lebih dari periode waktu di atas, maka diperlukan waktu pewarnaan yang lebih lama.


Prosedur
  1. Jaringan dapat difiksasi dengan setiap fiksatif, tetapi tidak boleh dalam fiksatif yang mengandung dichromat.
  2. Penanaman dengan parafin, tetapi seloidin dapat juga digunakan.
  3. Tempelkan irisan pada gelas benda, kemudian di parafinasi dengan xylene atau benzene.
  4. Cuci dengan alkohol absolut, kemudian dengan alkohol 99%.
  5. Rendam dalam reagen B selama 1 1/2 - 2 menit, hingga terbentuk kembali warna irisan yang asli.
  6. Cuci baik-baik dalam air.
  7. Rendam selama 5 menit dalam reagen C.
  8. Jaringan diperlakukan dengan alkohol 70% beberapa kali, kemudian uji di bawah mikroskop untuk menentukan apakah warna yang diperoleh pada jaringan sudah cukup. Harus diingat bahwa selama pengujian ini jaringan tidak boleh dibiarkan kering. Jika pewarnaan yang dikehendaki belum diperoleh, maka jaringan dikembalikan ke larutan zat warna lagi maka jaringan dikembalikan ke larutan zat warna lagi kemudian diuji lagi setelah terlebih dulu dicuci dengan alkohol 70% seperti tadi.
  9. Bila pewarnaan ini akan diberi warna imbangan maka warna imbangan yang paling banyak digunakan menurut Gurr (1960) ialah Haematoxylin-Orange G.
  10. Dehidrasi dengan alkohol absolut.
  11. Jernihkan dengan xylol dan tutup dengan D.P.X (Lendrum & Kirkpatrick) atau dengan crystalit.
 Hasil
Serabut elastik pada semua macam jaringan terpulas gelap "Mast Cell" (dengan fiksatif khusus) berwarna ungu gelap.

Catatan
Setelah menggunakan fiksatif yang mengandung sublimat, latar belakang jaringan akan berwarna biru-hijau pucat. Tetapi setelah penggunaan fiksatif formalin atau Bouin background tersebut menjadi tak berwarna. 
Perlakukan pada langkah-langkah ke 5 tersebut di atas ditujukan untuk semua jaringan baik yang difiksasi dengan fiksatif yang mengandung sublimat maupun yang tidak mengandung sublimat.

Tidak ada komentar:

Posting Komentar